| 随着疫情的常态化，大家越来越熟悉新冠核酸检测。新冠核酸快速检测是新冠病毒检测“金标准”，可是对于检验人来说，这个金标准可不简单，众所周知PCR检测技术本来就属于高技术检测。再加上新冠核酸检测的特殊性，对标本的检测带来巨大困难，随之而来的就是各种假阳性、假阴性的结果。那么如何解决这些问题就成为检验人的一个难题。其实如果我们对PCR检测了解多一些，其实这些问题是可以避免的。
一 假阴性结果原因：
l 试剂质量：试剂比对、性能验证、批间差等
检测试剂：灵敏度
提取试剂：提取效率
l 标本因素
标本类型：肺泡灌洗液、痰液、鼻拭子、咽拭子、肛拭子等
标本采集：采样不规范、部位不当、采集标本中被感染的细胞太少或没有。
标本保存、运输与处理：室温放置不超过4小时，应在2-4小时内送到实验室。长途运输应采用干冰等制冷方式保存。24小时未检测的样本应置于-70℃保存，新冠病毒RNA病毒靶基因降解对于RNA样品影响更加严重。
l 人员操作：采样、核酸提取、结果解读、问题分析纠正以及质量控制等。
二 如何避免假阴性措施
1： 要保证试剂的质量，必须建立试剂验证严格的SOP文件，每一批次的试剂比对、性能验证必须认真完成并形成书面报告已备溯源。
2: 重症以及危重症患者应该首选肺泡灌洗液以及痰液。普通筛查最好选用鼻拭子。
3: 操作人员一定选用技术能力合格，身体健康，心理素质较好的工作人员。
4: 核酸提取应该严格执行sop，符合试剂说明书要求，Sop建立必须科学具有操作性。
5：科学规范采样。
6：规范送检，合理时间检测可以有效预防假阴性。
7：PCR抑制物是造成假阴性的重要原因，所以实验室尽量不存放与实验无关物品，安全柜应该无多余物品。吸头选用去RNA酶的产品。
三 假阳性结果原因：
l 阳性质控品交叉污染
l 强阳性标本交叉污染
l 扩增产物污染
四 如何避免假阳性措施
1：如果2份假阳性样本均在阳性质控管附近，可以推测是加样操作不当引起。
2：某一批检测结果出现多个阳性结果，而且复检仍为阳性，但是在其它机构检测为阴性。这种结果多为样本中有一个强阳性，因为操作人员操作不当导致后续样本全为阳性，因为是原始样本污染，所以复检也为阳性。
3：实验人员在常规筛查中发现单靶标阳性，工作环境检测也能检测到，该情况多为扩增产物污染，该情况出现多为工作人员无分区概念，扩增区没有严格进行消毒造成高浓度扩增产物被带入到提取实验区，引起的假阳性。
上述情况均可以通过分区操作、严格实验室清洁消毒、加强操作人员的操作规范性避免。
4：严格执行三份阴性样本随机放在临床样本中参与整个提取扩增过程的质控策略。
5：扩增八连管的盖子一定要盖严以防泄露。
引起假阳性和假阴性的原因有很多，作为检验人应该严格执行SOP，提高实验人员的检验技能，把每个环节都落到实处，真正做到“做你所写，写你所做”，那么我们的检验报告将非常科学公正。同时在全面抗击疫情中展现出检验工作人员科学、专业、敬业的精神面貌。
参考文献：医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册（试行 第二版）
|
